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外周面神經損傷通常是由外傷、手術切除良性或惡性頭部或頸部腫瘤等引起的。常采用自體神經移植的方式來進行面部神經節段性缺損的重建，然而，永久性供區發病率、犧牲供神經的可用性、額外手術或手術時間延長，明顯限制了該方法的臨床應用。為了彌補自體神經移植的缺陷，結合最先進的3D生物制造技術、采用容易獲得的干細胞和各種類型的生物材料/支架來制造組織工程神經結構，正成為一種促進周圍神經再生的新方法。
美國賓夕法尼亞大學的Qunzhou Zhang團隊探討了人牙齦源性間充質干細胞(GMSCs)作為3D生物打印無支架神經結構中唯一的細胞成分的潛在用途，驗證該細胞可移植到大鼠面部神經缺損的可行性。
圖1. 三維GMSCs細胞球體的生成
該團隊從人類牙齦組織(GMSCs)中分離出一種獨特的源于神經嵴的MSC亞群。將GMSCs細胞進行培養，進行免疫細胞化學研究。采用流式細胞術檢測GMSC細胞球的凋亡和壞死。在二維和三維膠原支架上分別研究GMSCs細胞和GMSCs細胞球向神經細胞的分化趨勢。采用3D生物打印方式制造含GMSCs細胞的無支架神經組織，培養一段時間后將其植入成年大鼠面部，運用面癱評分進行面部功能分析，記錄肌肉動作電位，最后進行組織學和免疫組化研究。
圖2.將GMSC球體3D生物打印無支架神經結構
該研究證明了GMSCs傾向于形成致密的三維球體，其直徑在400~500 um之間，也可以產生自己的細胞外基質，因此適用于3D生物打印（圖1）。當在2D或3D膠原支架條件下培養時，GMSC球蛋白比其粘附物更容易分化為神經元細胞和神經鞘樣細胞。3D生物打印神經移植物縱、橫切片的組織學分析顯示其具有排列整齊的神經樣結構（圖2），證明了3D生物打印無支架神經組織的可行性。將3D生物打印神經移植到大鼠面神經頰后，7周的面癱評分高于硅膠管對照組（圖3）。
圖3. 3D生物打印無支架神經組織移植可促進大鼠面神經缺損的再生
最近的研究表明，人類GMSC具有誘導成神經祖細胞樣細胞(NPCs)的傾向，其對周圍神經再生的治療效果優于親代GMSC。同時，該團隊的研究展示了利用可植入的GMSC球面體構建三維生物打印無支架神經的可行性，促進了大鼠面神經缺損的修復和再生。因此，目前的研究提供了大量證據表明，GMSCs是一種易于獲得的干細胞來源，可作為細胞成分用于3D生物打印無支架神經構建，以滿足臨床對周圍神經修復和再生的日益增長的需求。相關推薦
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